痒安洗剂的薄层层析实验

摘要：目的建立痒安洗剂的薄层层析定性鉴别方法。方法采用薄层层析法对洗剂中蛇床子、苦参、花椒3味中药进行定性鉴别。结果供试品的色谱中，在与对照品、对照药材相应的位置上，均显相同颜色的斑点，空白无干扰。结论该方法斑点清晰，重现性好，可作为该制剂的定性控制方法。

关键词：痒安洗剂；薄层色谱法；苦参；蛇床子；花椒

痒安洗剂是我院皮肤科的经验方，由苦参、蛇床子、花椒等多味中草药提取而成，具有清热燥湿、祛风止痒、杀虫之功效，临床主要用于治疗皮肤瘙痒症，特别是由神经性皮炎医学教|育网搜集整理、疥疮等疾病所引起的皮肤瘙痒症疗效明显。本文对方中苦参、蛇床子、花椒3味中药用薄层层析法进行鉴别，以建立制剂的定性鉴别方法，控制药品质量，确保临床用药的安全有效。现报道如下。

1材料

痒安洗剂，由本院制剂中心提供；苦参碱、蛇床子素，均由中国药品生物制品检定所提供；硅胶G，青岛海洋化工厂提供；所用试剂均为分析纯；紫外分析仪，上海顾村电光仪器厂。

2方法

2.1蛇床子的薄层色谱鉴别

2.1.1蛇床子素对照品溶液的制备：取蛇床子素对照品适量，加甲醇制成每毫升含1mg的溶液，作为蛇床子素对照品溶液。

2.1.2蛇床子对照药材溶液的制备：取蛇床子对照药材1g，加乙醇10ml，超声处理5min，滤过，滤液作为蛇床子对照药材溶液。

2.1.3供试品溶液的制备：取痒安洗剂5ml，浓缩成稠膏状，加5ml乙醇，振摇后放置过夜，滤过，滤液作为供试品溶液。

2.1.4蛇床子阴性对照液的制备：按处方比例取缺蛇床子的其它药材适量，按痒安洗剂制备工艺制成蛇床子阴性样品，照供试品溶液的制备方法制得蛇床子阴性对照溶液。

2.1.5薄层层析：精密吸取以上4种溶液各5μl，分别点于同一块0.5%羧甲基纤维素钠的硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯（30：1）为展开剂，展开约10cm，取出，晾干，在紫外灯（365nm）下检视，在供试品色谱中，与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点，而阴性无干扰。

2.2苦参的薄层色谱鉴别

2.2.1苦参碱对照品溶液的制备：取苦参碱对照品适量，加乙醇制成每毫升含1mg的溶液，作为苦参碱对照品溶液。

2.2.2苦参对照药材液的制备：取苦参药材2g，加氯仿30ml，浓氨试液0.5ml，静置过夜，滤过，滤液于水浴上蒸干，残渣加乙醇2ml溶解，作为苦参对照药材溶液。

2.2.3供试品溶液的制备：取痒安洗剂5ml，用氨试液调节pH9～10，置分液漏斗中，氯仿萃取4次，5ml/次。合并氯仿液，置60℃水浴上挥干，残渣用无水乙醇溶解并定容至5ml，摇匀，离心，取上清液作为供试品溶液。

2.2.4苦参阴性对照液的制备：按处方比例取缺苦参的其它药材适量，按痒安洗剂制备工艺制成苦参阴性样品，照供试品溶液的制备方法制得苦参阴性对照溶液。

2.2.5薄层层析：精密吸取以上4种溶液各5μl，分别点于同一块0.5%羧甲基纤维素钠的硅胶G薄层板上，以苯丙酮甲醇（8：3：0.5）为展开剂，氨蒸气饱和，展开约10cm，取出，晾干，医学教|育网搜集整理再以甲苯醋酸乙酯甲醇水（2：4：2：1）10℃以下放置的上层溶液为展开剂，展开，展距同上，取出，晾干，喷以碘化铋钾溶液无水乙醇（2：1）试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙色斑点，而阴性无干扰。

2.3花椒的薄层色谱鉴别

2.3.1花椒对照药材液的制备：取花椒对照药材2g，加乙醚20ml，充分摇匀，浸渍过夜，滤过，滤液挥至约1ml，作为花椒对照药材溶液。

2.3.2供试品溶液的制备：取痒安洗剂10ml，用乙醚萃取2次，10ml/次。合并醚层，水浴挥醚至3ml，作为供试品溶液。

2.3.3花椒阴性对照液的制备：按处方比例取缺花椒的其它药材适量，按痒安洗剂制备工艺制成花椒阴性样品，照供试品溶液的制备方法制得花椒阴性对照溶液。

2.3.4薄层层析：精密吸取以上3种溶液各5μl，分别点于同一0.5%羧甲基纤维素钠的硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）醋酸乙酯（19：1）为展开剂，展开，展距约10cm，取出，晾干，喷以二硝基苯肼试液显色。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性无干扰。

3讨论

花椒的薄层色谱鉴别实验中，曾选用《中国药典》2000年版Ⅰ部花椒项下的薄层色谱鉴别条件，以正已烷醋酸乙酯（4：1）为展开剂，对花椒进行定性鉴别，结果表明斑点严重拖尾，分离效果差，且阴性实验有干扰。经3次重复实验，结果亦然。痒安洗剂中苦参碱、百部、花椒均含有生物碱，成分复杂，给分离鉴别带来了困难，特别是以薄层层析法进行定性实验时，各组分间相互影响，使斑点拖尾，分离不完全，因此提取方法和展开剂选择是本实验定性鉴别的关键。在苦参的薄层色谱鉴别实验中，曾分别以氯仿甲醇浓氨试液（5：0.6：0.2）、苯丙酮甲醇（8：3：0.5）、醋酸乙酯丙酮苯浓氨试液（4：3：2：0.2）为展开剂一次展开、或以苯丙酮甲醇（8：3：0.5）和甲苯醋酸乙酯甲醇水（2：4：2：1）两次展开，结果发现前3种展开剂展开效果不好，第4种展开系统虽要经两次展开，操作较复杂，但分离效果好，重现性好，且阴性无干扰，可作为本制剂苦参的定性鉴别方法。

生物碱鉴别实验中显色剂的选用：实验中曾分别以碘化铋钾无水乙醇溶液（2：1）和联用碘化铋钾试液、亚硝酸钠乙醇试液作为显色剂，前者显色时间短，放置后很快开始褪色，医学教|育网搜集整理后者是药典方法，当先后喷以碘化铋钾试液、亚硝酸钠试液显色后，板面的颜色变得很深，掩盖了所有斑点，显色效果差。但当再喷以碘化铋钾无水乙醇试液时，斑点重现，而且经过3次显色后的斑点不容易褪色。