HDL-C检测方法
概述 测定血清HDL-C通常需根据各种脂蛋白的密度、颗粒大小、电荷等应用超速离心法、色谱法、电泳法、化学或免疫沉淀法将HDL与其他脂蛋白分离开,测定HDL组分中胆固醇(Chol)含量。美国疾病控制与预防中心(CDC)测定HDL-C的参考方法为超速离心法,也为NCEP所推荐。此法主要用于靶值的确定及各种HDL-C检测方法学评价,但因需特殊仪器,对技术操作要求高,一般实验室难以开展。CDC胆固醇参考方法实验室网络(CRMLN)近来选用了一种“指定性比较方法”(DCM法)作为转移CDC参考方法准确性的适用方法-硫酸葡聚糖-镁(DS50-Mg2+)沉淀结合ALBK法。这种方法相对CDC参考方法而言,已大为简化。色谱法和电泳法因仪器、操作要求高等种种原因临床常规实验室也较少应用,多用于脂蛋白的研究。
目前临床常规实验室直接分离测定HDL-C的方法大致可分为3代。第1代为化学沉淀法,常用的沉淀剂为多阴离子,如磷钨酸(PTA)、DS、肝素(Hep)或非离子多聚体如聚乙二醇(PEG)与某些两价阳离子(如Mg2+、Ca2+、Mn2+)合用。最早为美国国立卫生研究院(NIH)所采用的肝素-锰沉淀法(HM法),后多采用DS50-Mg2+法,欧洲则多采用磷钨酸镁沉淀法(PTA-Mg2+法)和聚乙二醇沉淀法(PEG法)。1995年中华医学会检验分会曾在国内推荐PTA-Mg2+法作为HDL-C测定的常规方法。但此类方法常因含apoB的脂蛋白组份沉淀不完全导致结果假性偏高。第2代采用简便的磁珠DS-Mg2+分离法(美国Reference Diagnostics公司试剂),省去了离心步骤,但需特殊装置,试剂不适于推广应用。第3代为匀相测定法,标本用量少,不需沉淀处理,可用于自动生化分析仪测定,在准确度和精密度方面基本达到NCEP 的分析目标,因此在短短的数年里迅速被临床实验室采用。