中药化学成分分离和鉴别的方法

色谱法是中药化学成分分离和鉴别的重要方法之一，由于现代色谱技术具有分离和分析两种功能，非常适合成分复杂的中药的真实性鉴定和质量评价，既可作定性分析，又可作定量分析。根据分离方法分为：纸色谱法、薄层色谱法、柱色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法、电泳色谱法等。

1.薄层色谱法薄层色谱法系将供试品溶液点于薄层板上，在展开容器内用展开剂展开，使供试品所含成分分离，所得色谱图与适宜的对照物(对照品或对照药材)按同法所得的色谱图对比，用予中药真实性鉴别;并可用薄层色谱扫描法，进行含量测定。

薄层色谱法因其快速、简便和灵敏，是目前中药鉴定中用于定性鉴别使用最多的色谱法之一。《中国药典》2005年版一部用薄层色谱法进行定性鉴别的达1523项，2010年版又在此基础上大量增加了许多具有专属性的薄层色谱鉴别项，并有10多种药材、30多种中成药采用薄层扫色谱描法进行含量测定。

2.高效液相色谱法高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。注入的供试品，由流动相带入柱内，各成分在柱内被分离，并依次进入检测器，由记录仪、积分仪或数据处理系统记录色谱信号。

高效液相色谱法具有分离效能高、分离速度快、灵敏度和准确度高、重现性好、专属性强等特点，因该法不受样品挥发性的约束，对低挥发性、热稳定性差、高分子化合物和离子型化合物均较适合，高效液相色谱既可用于定性鉴别又可用于定量分析，现已成为中药含量测定方法的首选和主流。

3.气相色谱法气相色谱法系采用气体为流动相(载气)流经装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。物质或其衍生物气化后，被载气带入色谱柱进行分离，各组分先后进入检测器，用记录仪、积分仪或数据处理系统记录色谱信号。

气相色谱法最适用于含挥发油及其他挥发性成分的药材及中成药的分析，用于药品的鉴别、杂质检查、水分测定、农药残留量测定和含量测定

4.电泳色谱法利用中药含有蛋白质、氨基酸等带电荷的成分，在同一电场作用下，由于各成分所带电荷性质、数目及分子质量不同，因而泳动的方向和速度不同，在同一时间内，各成分移动距离不同，出现谱带的数不同和染色深浅不同而达到分离鉴定的目的。动物类、果实种子类及根茎类等含蛋白质及氨基酸类成分的药材，已用该法成功地进行真伪鉴别。如蛇类药材及其伪品，西洋参、人参及其伪品，山药及其伪品，紫苏子及其伪品的鉴别等。

特别是高效毛细管电泳(highperformancecapi11aryelectrophoresis，HPCE)，是近几年分析化学中发展最为迅速的领域之一，它是一类以毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力，依据供试品中各组分淌度和(或)分配行为鲍差异而实现各组分分离的一种分析方法。它兼有高压电泳的高速、高分辨率及高效液相色谱(HPLC)的高效率等优点，广泛用于离子型生物大分子，如氨基酸、多肽、蛋白质及核酸等的快速分析，手性化合物等生物活性物质分离，DNA序列和DNA合成中产物纯度的测定等，它使得分析科学从微升水平进入纳升水平，并使单细胞分析乃至单分子分析成为可能。高效毛细管电泳技术在中药鉴定、生物分析及生命科学领域中有着极为广阔的应用前景。如对12种海马、海龙类药材采用HPCE进行鉴别研究，结果表明种间区别较明显。